솔루션 개요

다중 매개변수 Flow Cytometry의
데이터 CV 개선

과제

임상시험부터 코로나19 관련 면역학 연구까지 다중 매개변수 Flow Cytometry(유세포 분석)에서 매개변수 수를 늘려야 한다는 요구가 높아지고 있습니다. 하지만 Flow Cytometry는 통계적 방법입니다. 세포의 자연스러운 변화와 개별 세포에 결합하는 각 형광 색소의 양은 구성된 데이터가 단일 점이 아니라 "점 구름"을 형성한다는 것을 의미합니다. 따라서 명확한 계산을 위해서는 점 구름의 겹침을 줄이기 위해 이 데이터의 변동 계수(CV 또는 rCV)를 가능한 모든 방법으로 최소화해야 합니다.

솔루션

Coherent의 OBIS 스마트 레이저 제품군은 두 가지 방식을 통해 낮은 CV로 더 많은 수의 매개변수를 지원합니다. 첫째, 낮은 진폭 노이즈, 높은 빔 품질 및 내열성 포인팅을 특징으로 하는 탁월한 신호 대 잡음비(SNR) 레이저가 있습니다. 이는 레이저 SNR이 데이터 노이즈에 직접 기여하고 따라서 전체 데이터 CV에 기여하기 때문에 중요한 이점입니다. 둘째, 이 레이저는 여러 가지 다른 기술을 활용하여 이제 30개 이상의 다른 여기 파장을 전달합니다. 특히, 새로운 UV 및 근적외선 파장은 감지 스펙트럼 대역폭을 직접 증가시킬 수 있습니다. 대역폭을 높이면 동일한 스펙트럼 분리를 유지하면서 동일한 기기에서 더 많은 매개변수를 측정할 수 있습니다. 이는 데이터 CV를 낮추는 것과 동일한 효과를 나타냅니다.

빔 품질은 플로우 스트림 전반에 걸쳐 거의 균일한 강도를 생성하는 능력에 영향을 미칩니다. 빔 품질이 기기 노이즈에 미치는 영향은 부분적으로 대상 세포의 크기에 따라 다릅니다. 더 작은 세포는 플로우 스트림 내 위치상 변화가 다양하고 더 나은 여기 균일성을 필요로 합니다. OBIS 레이저는 일반적으로 M2 ≤1.2 미만의 빔 품질 매개변수로 원형 출력 빔을 생성합니다. 이는 혈구 수 계산에 잘 맞습니다. 그와 반대로 M2가 높으면 근거리 장과 원거리 장 모두에서 균일하지 않은 패턴이 발생합니다.

또한 OBIS 레이저는 출력 전력을 선택할 수 있으며 직접 변조를 지원하므로 기기 처리 속도를 높이고 기기 복잡성을 줄일 수 있습니다.

혜택

아무리 잘 설계되고 조립된 기기라도 그 성능은 결국 중요한 구성 요소의 성능에 달려 있습니다. 레이저는 틀림없이 Flow Cytometry에서 가장 중요한 구성 요소입니다. 레이저의 성능은 데이터 CV를 증가시키는 제한 요소가 되어서는 안 됩니다. OBIS 레이저를 사용하면 가장 까다로운 임상 및 연구 응용 분야에서 최적의 성능을 보장합니다.

 

응용 분야

다중 매개변수 Flow Cytometry, 면역학, 혈액학, 혈액 분석.

Figure 1

그림 1: 다중 매개변수 기기에서 각 세포 유형은 국소 데이터 포인트가 아닌 "도트 플롯"이라고 하는 데이터 포인트의 확산을 생성합니다. 이미지 제공: IDEXX Laboratories, Inc.

 

Figure 2

그림 2: 큰 M2는 심한 불규칙성과 함께 집중된 강도 패턴을 유발할 수 있습니다(위). OBIS 레이저는 M2 ≤1.2(원형 초점 스팟 포함)를 전달합니다(아래).

 

Figure 3
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